常见植物生理生化实验技术
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  • 2012-12-25 14:43:04
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植物生理学是研究植物生命活动规律的科学,其实验技术包括层析技术、光学分析技术、电泳技术、免疫分析技术酶联免疫吸附测定法、红外线CO2气体分析技术和气体测压技术。

在农业生产研究中,植物生理学研究常用实验技术及其测定仪器:

(一)植物光合生理测定技术,常用方法是测定CO2的吸收、氧的释放和有机物的积累。目前,应用红外线CO2气体分析仪——光合作用测定系统是测定植物光合、呼吸过程中CO2浓度的最有效方法,该系统为体积小、质量轻的便携式仪器,具有可靠、灵敏度、速度快、简便等优点,常用测定仪器有:LI-6400CIRAS-2CI-310TPS-1等。

(二)植物叶绿素荧光技术,该技术在测得叶片光合作用过程中光系统对光能的吸收、传递、耗散、分配等方面具有独特的作用。目前常用测定仪器有:FMS2PAM-2000等。

(三)植物群体结构的研究技术,其主要生理指标有:植物的叶面积指数(LAI)、叶片着生状态——叶向值(LOV)、透光率、植物冠层消光系数等。目前常用测定仪器有:植物冠层分析系统CI-110、叶面积分析仪CI-203等。

(四)紫外可见分光光度技术,是基于物质对电磁辐射的选择吸收而建立的分析方法,原理上属于分子吸收光谱分析法,主要用于常规生化测定、酶动力分析等,目前常用测定仪器有:日本岛津公司生产一系列的紫外可见分光光度计如UV1700

常规的生化物质含量、酶动力学分析等植物生理生化指标测定方法有:(1)蛋白质含量采用考马斯亮蓝G-250染色法测定;(2)氨基酸总量采用茚三酮比色法进行测定;(3)可溶性糖含量采用蒽酮比色法进行测定;(4)淀粉含量采用碘显色法进行测定;(5)丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸显色法进行测定;(6)脯氨酸含量采用磺基水杨酸法进行测定;(7)过氧化物酶(POD)活性采用联苯胺法进行测定;(8α-淀粉酶活性采用3,5-二硝基水杨酸比色法进行测定;(9)超氧化物岐化酶(SOD)活性采用NBT光还原法进行测定。(10)过氧化氢酶(CAT)活性采用过氧化氢分解量法进行测定。

(五)植物组织显微摄影技术,已经在生科学研究中得到广泛应用。目前常用测定仪器有:研究型荧光生物显微镜奥林巴斯Bx51、体视显微镜、倒置相差显微镜、生物学显微镜BX51T-32型等。

(六)免疫分析技术酶联免疫吸附测定法(ELISA),主要用于对植物体内含量或残留量很低的成分进行快速而精确的测定,其中最主要包括植物激素及生长调节剂、次生代谢物质、农药残留物和毒素等。该方法具有灵敏专一、操作简便等优点。目前常用测定仪器有:酶标仪等。

引自——李合生主编. 植物生理生化实验室原理和技术》,北京:高等教育出版社,2000王晶英主编,《植物生理生化实验技术与原理》,哈尔滨:东北林业大学出版社,2003